一、准备工作
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棉签选择
（1）使用无碳化、低TOC背景值的专用TOC清洁验证棉签，避免使用含纤维素棉签（可能释放有机物干扰结果）。
（2）预先检测棉签TOC本底值，确保其符合方法要求（<50 μg/L，<50 ppb）。
推荐使用恒创世纪KTCPS712A清洁验证棉签（低背景值、高回收率、双层聚酯针织大方头、可折断设计）。 -
溶剂准备
（1）选择高纯度水（如注射用水或超纯水）或低TOC有机溶剂（如乙醇），需验证溶剂与待测样品的兼容性。
（2）溶剂需通过TOC空白测试（通常要求≤50 ppb）。 -
设备与工具
（1）无菌手套、无尘布、镊子、标记笔、密封袋/瓶。
（2）校准后的TOC分析仪。
二、取样操作步骤
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表面预处理
（1）确保设备表面已干燥，避免残留水分稀释样品。
（2）若表面有复杂结构（如管道、焊缝），优先选择最难清洁部位（最差条件）作为取样点。 -
棉签润湿
将棉签头部浸入溶剂，轻轻挤压去除多余液体，保持湿润但不滴水。 -
擦拭面积确定
擦拭取样面积一般为5cm×5cm。根据检验需求，可适当增加面积，如10cm×10cm；设备面积不足则按实际面积计算。 -
擦拭方法
将棉签头按在取样表面，用力使其弯曲与表面成45°，平稳缓慢擦拭，覆盖整个取样区域。
翻转棉签，另一面擦拭，方向垂直于前次擦拭。每支棉签擦拭面积约25cm²，避免与微生物取样点重复。 -
棉签回收
（1）将棉签头剪入含溶剂的密封容器（如15 mL离心管），记录溶剂体积（如10 mL）。
（2）复杂表面可延长擦拭时间或使用专用长杆棉签（如恒创世纪KTCPS740）采样深孔缝。
三、样品处理与分析
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提取与保存
（1）超声或涡旋振荡30分钟，提高有机物溶出效率。
（2）样品若无法立即检测，需冷藏（2-8℃）避光保存，48小时内分析。 -
TOC检测
（1）校准TOC分析仪，确保符合USP或EP标准。
（2）检测样品溶液，结果扣除棉签和溶剂空白值。
计算公式：
C = （浓度），V = 溶剂体积，A = 擦拭面积
四、关键注意事项
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避免污染
操作全程佩戴手套，避免皮肤接触棉签和样品，使用一次性无菌工具，防止交叉污染。 -
回收率验证
进行回收率实验（如涂布已知浓度标准品后取样），回收率通常要求≥50%，低回收率时需优化擦拭方法或改用表面冲洗法。 -
数据记录
详细记录取样位置、时间、操作人员、环境温湿度，保留原始色谱图或TOC数据以备审计。
五、总结
本文介绍了TOC清洁验证棉签的详细使用步骤。通过规范操作和严格验证，棉签取样法能有效评估清洁效果，确保符合GMP及相关法规要求。实际应用中应结合具体场景进行调整。